常见酵母的鉴定(四） 鉴定无性繁殖为两极出芽

(十)克勒克酵母属(Kloechera)

细胞柠檬形、酵母卵形至长椭圆形或细长形。鉴定无性繁殖为两极出芽，酵母假菌丝有或无。鉴定能发酵糖，酵母不同化氮源。鉴定广泛存在于水果，酵母可能污染果汁，鉴定可使酒失去香味并混浊。酵母

(十一)丝孢酵母属(Trichosporon)

出芽细胞各种形态，鉴定假菌丝发达，酵母有真菌丝，鉴定经常有节孢子，酵母通常较丰富。鉴定在液体培养基上形成菌醭。酵母不产生子囊孢子、掷孢子和节孢子。可形成无性的内生孢子。

三、培养基

(一)麦芽汁液体培养基

成分：15波林麦芽汁，pH5.4。

制法：分装小管，每管约3mL，115⁰C 15min灭菌。

(二)麦芽汁固体培养基

成分：10波林麦芽汁，琼脂2％。

制法：分装小管，115⁰C 15min灭菌，放置斜面。

(三)麦氏培养基

成分：葡萄糖0.10％，氯化钾0.18%，酵母汁0.25%，乙酸钠0.82％，琼脂1.5％。

制法：用蒸馏水配制，分装小管，115⁰C 15min灭菌，放置斜面。

(四)克氏培养基

成分：磷酸二氢钾0.012％，磷酸氢二钾0.02％，乙酸钠0.5％，葡萄糖0.062％，氯化钠0.062％，蛋白胨0.25％，水洗琼脂2％，生物素(biotin)2.0μg/100mL，混合盐类1mL(每100mL，培养基中含量)。

制法：培养基用蒸馏水配制，pH6.9～7.1，分装小管，115⁰C 30min灭菌，放置斜面。

(五)葡萄糖-酵母汁-蛋白胨液体培养基

成分：葡萄糖20g，蛋白胨10g，酵母汁5g，蒸馏水1000mL。

制法：将上述成分溶解于蒸馏水中，116⁰C 15min灭菌。

(六)葡萄糖-酵母汁-蛋白胨琼脂培养基

成分：葡萄糖20g，蛋白胨10g，酵母汁5g，琼脂20g，蒸馏水1000mL。

制法：将上述成分溶解于蒸馏水中，分装小试管，116⁰C 15min灭菌，放置斜面。

(七)马铃薯琼脂培养基

成分：马铃薯100g，葡萄糖20g，琼脂20g，自来水1000mL。

制法：将100 g洗净去皮的马铃薯擦成丝状，浸于300mL自来水中，冷浸后取230mL加770mL水，总体积为1000mL，加葡萄糖和琼脂，溶化过滤，装大管各20mL，115⁰C 15min灭菌。

(八)玉米粉琼脂培养基

成分：黄玉米粉12.5g,琼脂3.8g,水300mL。

制法：将玉米粉搅匀于300 mL水中，以60℃热水浴保温1h，用滤纸过滤，滤液加水至300mL，加琼脂，121℃15min灭菌，趁热用脱脂棉过滤，装大管各20mL，115⁰C 15min灭菌。

(九)酵母发酵培养基

1、各种糖液：以纸谱纯的葡萄糖、半乳糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、棉子糖、蜜二糖等糖类，预先用无菌蒸馏水分别配制成10}6溶液，煮沸15min备用。

2、发酵用含糖培养基：取12.5％豆芽汁或0.6％酵母粉浸汁1.2mL，加入小管内，再放入一小套管(倒置)，115⁰C 30min灭菌后，加入无菌的10％糖液0.3mL，放置一个时期，使小管内外糖液尽可能扩散均匀，然后接种。

3、12.5％豆芽汁：黄豆芽125 g加水1L，煮沸30min，过滤加水到1L，115⁰C 30min灭菌，备用。

4、0.6%酵母粉浸汁：加60g干酵母粉于1L水中，必要时加一些蛋清以澄清滤液，121⁰C：灭菌15min，趁热用双层滤纸过滤，再以115℃30min灭菌，备用。

(十)酵母同化碳源培养基

成分：硫酸铵0.5％，磷酸二氢钾O.1％，硫酸镁(MgSO₄·7H₂O)0.05％，氯化钙(CaC1₂·2H₂O)0.01％，氯化钠0.01％，糖或其他碳源O.5％，酵母膏(也可用豆芽汁代替)O.02%。

制法：用蒸馏水配制，培养基过滤后装小试管，每管约2～3mL，115⁰C 15min灭菌。

(十一)酵母同化乙醇基础培养基

成分：硫酸铵O.1%，磷酸二氢钾 O.1％，硫酸镁(MgSO₄·7H₂O)O.05%，酵母膏O.01％。

制法：用蒸馏水配制，过滤后每小管定量装5mL，115⁰C 15min灭菌，临用时加3%乙醇(用99%乙醇O.15mL)。

(十二)酵母同化氮源基础培养基

成分：葡萄糖2%，磷酸二氢钾0.1％，硫酸镁(MgSO₄·7H₂O)0.05％，酵母膏0.02%，水洗琼脂2％。

注：酵母膏也可 20％豆芽汁代替，加入量为O.2％。

制法：用蒸馏水配制，过滤，装大试管，每管20mL，115⁰C 15min灭菌。

(十三)杨梅苷培养基

成分：杨梅苷0.5％，水洗琼脂2％，10%豆芽汁100mL。

制法：上述成分溶化后装小试管，115⁰C。15 min灭菌，使用前临时再溶化，于各管加1滴10％三氯化铁(FeCl₃，用无菌水配)，放置斜面。

参考资料：食品卫生微生物检验标准手册

相关链接：马铃薯琼脂培养基，麦芽汁固体培养基，克氏培养基

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